Απομόνωση μεσγχυματικών βλαστικών κυττάρων από οδοντικό πολφό

Σ. Γαργάνη, Β. Κατσαρές, Α. Πέτσα, Ζ. Παπαρίδης, Ε. Νικολαΐδου,

Ν. Γρηγοριάδης, Ι. Γρηγοριάδης

Biogenea-Cellgenea Ε.Π.Ε.

Τσιμισκή 43, Εμπορικό και Επιχειρηματικό Κέντρο «Πλατεία»

Κτίριο Α΄ - 5^ος Όροφος

Τ.Κ. 54623 Θεσσαλονίκη, Ελλάδα

Εισαγωγή: Η επιτυχημένη εφαρμογή των βλαστικών κυττάρων συγκεντρώνει έντονο ενδιαφέρον επιστημονικό ενδιαφέρον. Πρόσφατα αναδείχθηκε μια νέα πηγή μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων (ΜΒΚ), αυτή του οδοντικού πολφού. Η απομόνωση και η καλλιέργειά τους προσθέτει νέα δεδομένα στην Αναγεννητική Ιατρική και δίνει τη δυνατότητα αυτόλογης μεταμόσχευσης για την αντιμετώπιση παθολογικών καταστάσεων. Επιπλέον, υπάρχει δυνατότητα μελλοντικής εφαρμογής στην αντιμετώπιση ορισμένων εκφυλιστικών ασθενειών των οστών και του νευρικού συστήματος.

Σκοπός: Η διαδικασία απομόνωσης, καλλιέργειας και κρυοσυντήρησης των ΜΒΚ από τον οδοντικό πολφό. Εξετάζεται η σχέση του φύλου με τον αριθμό των κυττάρων, ο χρόνος καλλιέργειας και η βιωσιμότητά τους. Η έρευνα αυτή μπορεί να προσφέρει νέες πληροφορίες για τις μεθόδους επεξεργασίας και τις κλινικές εφαρμογές.

Υλικά-Μέθοδοι: Αναλύθηκαν δείγματα οδοντικού πολφού. Τα δόντια αφαιρέθηκαν από οδοντίατρο και τοποθετήθηκαν σε ειδικό διάλυμα για την ασφαλή μεταφορά σε θερμοκρασία δωματίου. Αφαιρέθηκε ο οδοντικός πολφός και επεξεργάστηκε ενζυμικά ώστε να απομονωθούν τα ΜΒΚ. Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν για εύλογο χρονικό διάστημα και ο αριθμός τους προσδιορίστηκε με την τεχνική Trypan Blue Exclusion Test, καθώς και τη μέθοδο κυτταρομετρίας ροής. Η στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων έγινε με το στατιστικό πακέτο SPSS.

Αποτελέσματα: Η μέση τιμή της ηλικίας των δοτών ήταν 8,19 έτη με εύρος τιμών από 5,5 ως 19. O μέσος αριθμός κυττάρων που απομονώθηκαν ήταν 4,1x10⁶ με ελάχιστη και μέγιστη τιμή στα 1,01x10⁶ και 15,6x10⁶ κύτταρα αντίστοιχα, ενώ η βιωσιμότητα των δειγμάτων ήταν μεγαλύτερη από 95%. Δεν παρατηρήθηκαν στατιστικά σημαντικές διαφορές στο χρόνο καλλιέργειας και τον αριθμό των απομονωμένων κυττάρων ανάμεσα στα δύο φύλα.

Συμπεράσματα: Η διαδικασία απομόνωσης, επεξεργασίας και κρυοσυντήρησης που εφαρμόζεται παρέχει σε μικρό χρονικό διάστημα ικανό αριθμό ΜΒΚ από τον οδοντικό πολφό. Τα δόντια αφαιρούνται εύκολα και ανώδυνα, επομένως ο οδοντικός πολφός αναδεικνύεται μια αξιόλογη πηγή ΜΒΚ. Τα κύτταρα αυτά μπορούν να διαφοροποιηθούν in vitro προς διάφορους τύπους κυττάρων, όπως: οστεοβλάστες, χονδροκύτταρα και νευρικά κύτταρα.